光散射檢測器是一類基于瑞利散射理論,通過測量溶液中溶質(zhì)顆粒散射光強度實現(xiàn)分子特性分析的高d分析儀器,廣泛應用于高分子材料、生物大分子及納米材料表征領(lǐng)域。其核心技術(shù)原理是通過激光照射溶質(zhì)顆粒,捕捉散射光信號的強度與角度分布,進而推算分子量、回轉(zhuǎn)半徑、支化度等關(guān)鍵參數(shù)。
根據(jù)檢測角度差異,光散射檢測器可分為多角度激光光散射檢測器(MALS)和小角度光散射檢測器(LALS)。MALS通過12-165度范圍內(nèi)多個檢測角度的協(xié)同分析,結(jié)合角度外推法計算零角度散射強度,顯著提升分子量測定精度,例如懷雅特HELEOSⅡ型檢測器可測定10³-5×10?道爾頓分子量,并支持旋轉(zhuǎn)半徑與第二維利系數(shù)計算。LALS則采用7°單一檢測角度設(shè)計,直接測量近零角度散射光強,避免角度外推誤差,更適用于蛋白質(zhì)等生物大分子分析。
一、光源系統(tǒng)
激光器:
作用:產(chǎn)生穩(wěn)定、單色、高強度的光束,作為光散射的入射光源。
類型:常用半導體激光器(如波長635nm、功率3mW的激光器)或氦-氖激光器,具有光參數(shù)穩(wěn)定、效率高、壽命長(可達25000小時以上)的優(yōu)點。
選擇依據(jù):根據(jù)檢測需求選擇合適波長和功率的激光器,以確保光散射信號的強度和穩(wěn)定性。
光束整形與準直:
作用:對激光器發(fā)出的光束進行整形和準直,使其成為平行光束,提高光散射信號的采集效率。
組件:包括透鏡組、光闌等光學元件,用于調(diào)整光束的直徑、發(fā)散角和方向。
二、樣品室與分散系統(tǒng)
樣品室:
作用:容納待測樣品,確保樣品與光束充分相互作用,產(chǎn)生光散射信號。
設(shè)計要求:樣品室應具有良好的光學透明性、密封性和耐腐蝕性,以防止樣品污染和光散射信號的衰減。
類型:根據(jù)檢測需求,樣品室可分為濕法樣品室和干法樣品室。濕法樣品室適用于液體樣品,干法樣品室適用于固體粉末樣品。
分散系統(tǒng):
作用:將樣品分散成單個顆粒或細胞,確保光散射信號的準確性和重復性。
濕法分散:采用攪拌、超聲等方式使樣品均勻分散在液體中。例如,使用高功率離心泵和超聲振蕩器輔助分散,防止顆粒團聚。
干法分散:采用壓縮空氣吹散、負壓吸入等方式使固體粉末樣品分散成單個顆粒。例如,通過螺旋分散器和振動進樣器實現(xiàn)樣品的均勻給樣。
三、光散射信號采集系統(tǒng)
探測器陣列:
作用:捕獲不同角度的光散射信號,將其轉(zhuǎn)換為電信號進行后續(xù)處理。
類型:常用光電二極管(PD)、光電倍增管(PMT)或電荷耦合器件(CCD)作為探測器。
排列方式:探測器陣列通常呈環(huán)形或線性排列,覆蓋廣泛的角度范圍(如0.011°-170.02°),以捕獲多角度光散射信號。部分儀器還配備斜向放置的測量池和大角度多方位檢測器,提高分辨率。
信號放大與處理:
作用:對探測器采集到的微弱電信號進行放大、濾波和模數(shù)轉(zhuǎn)換,以便于后續(xù)的數(shù)據(jù)處理和分析。
組件:包括前置放大器、主放大器、濾波器和模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC)等電子元件。
四、光路系統(tǒng)與輔助組件
光路系統(tǒng):
作用:確保光束準確照射在樣品上,并引導光散射信號到達探測器陣列。
組件:包括反射鏡、分光鏡、透鏡組等光學元件,用于調(diào)整光束的方向、聚焦和分光。
設(shè)計特點:采用反傅里葉光學變換設(shè)計或傅里葉透鏡組,優(yōu)化光路設(shè)計,使更多光束能夠通過測量池,確保小顆粒產(chǎn)生的散射光也能被完q捕捉。
輔助組件:
溫度控制單元:維持樣品室和光學元件的溫度穩(wěn)定,防止溫度變化對光散射信號的影響。
防震裝置:減少外界振動對光路系統(tǒng)和探測器陣列的影響,提高測量穩(wěn)定性。
清潔系統(tǒng):定期清潔光學元件和樣品室,防止灰塵和污染物對光散射信號的干擾。
五、數(shù)據(jù)處理與分析系統(tǒng)
數(shù)據(jù)采集卡:
作用:將模數(shù)轉(zhuǎn)換器輸出的數(shù)字信號采集到計算機中,進行后續(xù)的數(shù)據(jù)處理和分析。
性能要求:具有高速、高精度的數(shù)據(jù)采集能力,以確保光散射信號的準確記錄。
數(shù)據(jù)分析軟件:
作用:對采集到的光散射信號進行反演計算,得到顆粒或細胞的粒徑分布、濃度等參數(shù)。
功能特點:采用先進的反演算法(如H.Golub分布反演算法)和散射理論(如米氏散射理論或夫瑯禾費衍射理論),結(jié)合獨特的儀器硬件設(shè)計,使測試數(shù)據(jù)更加精確、快捷。同時,軟件還支持粒度分布曲線、直方圖及典型粒徑值報告的生成,便于用戶進行數(shù)據(jù)分析和結(jié)果展示。
